Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito dos crioprotetores glicerol e etilenoglicol em duas concentrações (1,5 M e 3,0 M) sobre a viabilidade de folículos pré-antrais caninos após exposição e criopreservação. Ovários (n=8) de cadelas, sem raça definida, foram submetidos ao processo de isolamento mecânico simples para resgate dos folículos pré-antrais. Em seguida, amostras do pool folicular foram destinadas a avaliação da viabilidade, após o teste de toxicidade com exposição de 20 minutos ao glicerol e etilenoglicol e após congelação/descongelação, utilizando o corante fluorescente iodeto de propídeo. No teste de toxicidade, apenas o grupo que utilizou etilenoglicol a 1,5 M (51,5%) não apresentou redução significativa da viabilidade folicular em relação ao controle (63,2%). Após os procedimentos de criopreservação, a viabilidade foi consideravelmente menor em todos os grupos, sendo 12% para glicerol (1,5 M), 15,5% para etilenoglicol (1,5 M), 14% para glicerol (3,0 M) e 28% para etilenoglicol (3,0 M). Ressaltando-se a necessidade de aperfeiçoamento das técnicas de criopreservação de folículos pré-antrais caninos, conclui-se que o etilenoglicol demonstrou os melhores resultados após o período de exposição e procedimentos de criopreservação/descongelação.