RESUMO Objetivos: avaliar o efeito de uma intervenção educativa pautada em simulação clínica na adesão de profissionais de enfermagem às práticas de prevenção de infecções primárias de corrente sanguínea associadas ao cateter venoso central de inserção periférica em Unidade de Terapia Intensiva Neonatal. Métodos: estudo quase-experimental, com avaliação pré e pós-intervenção com um grupo único. A população foi de 41 profissionais de enfermagem, sendo realizadas 31 observações antes e após intervenção. As análises foram por meio de estatística descritiva e pelo Teste Não Paramétrico de McNemar. Adotou-se um nível de significância de 5%. Resultados: após a intervenção, houve aumento da adesão às práticas de prevenção de antissepsia cirúrgica e higiene das mãos do profissional, antissepsia da pele com clorexidina, espera do tempo do efeito da clorexidina alcoólica e cumprimento da técnica estéril. Conclusões: a intervenção educativa mostrou efeito no aumento da adesão às práticas de prevenção da infecção associadas ao cateter.