La tribu Hippeastreae es compleja taxonómicamente, cariológicamente variable y posee importancia fitoquímica y ornamental, cuyo centro de distribución se encuentra en la región subtropical de Sudamérica. Particularmente, Paraguay dispone de escasa información sobre citología y reproducción de procedencias nativas de esta tribu. A fin de contribuir con la caracterización de fitorecursos paraguayos nativos de la tribu, se ha determinado el nivel de ploidía con técnicas citogenéticas, citometría de flujo y caracterización reproductiva sobre fertilidad. Se analizaron individuos de poblaciones naturales y de material cultivado del Departamento Central, Paraguay, durante los años 2019 y 2022. Se encontraron los siguientes números somáticos: Habranthus brachyandrus (Baker) Sealy, 2n = 4x = 24; Habranthus tubispathus (L’Hér.) Traub, 2n = 4x = 24; Hippeastrum puniceum (Lam.) Voss, 2n = 2x = 22; H. vittatum (L’Her.) Herb., 2n = 4x = 44; y Z. mesochloa Herb. ex Lindl., 2n = 2x = 12. Mediante citometría de flujo en tejidos foliares se confirmó el nivel de ploidía diploide en individuos de Hippeastrum reticulatum (L’Hér.) Herb (2n = 2x = 22) y tetraploide en Habranthus brachyandrus (2n = 4x = 24). La fertilidad analizada por la viabilidad de polen y producción media de semillas fue de 79% y 20 semillas por cápsula en Hippeastrum puniceum, 96% y 12 semillas/cápsula en H. vittatum, 83% y 43,75 semillas/cápsula en Z. mesochloa y 65,25 semillas/ cápsula en Habranthus brachyandrus. Los aportes sobre fertilidad, números cromosómicos y nivel de ploidía de Habranthus brachyandrus, H. tubispathus, Hippeastrum vittatum y H. reticulatum son primicia para Paraguay.