Os óleos essenciais extraídos de plantas medicinais têm se mostrado uma alternativa na procura de larvicidas naturais. Desta forma, o presente estudo teve por objetivo avaliar a atividade larvicida do óleo essencial extraído das folhas de Origanum vulgare L. O óleo essencial foi extraído por hidrodestilação a 100°C por 3 h, com caracterização química através de Cromatografia Gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG-EM). Em seguida, avaliou-se a letalidade do óleo essencial frente ao Aedes aegypti, calculou-se a CL50 para ação do óleo essencial a partir do método de Probit. Os constituintes majoritários encontrados no óleo essencial de O. vulgare foram Timol (72,14%) e p-Cimeno (12,25%). A atividade larvicida do óleo essencial apresentou a CL50 de 31,66 mg L-1. Os resultados indicam que o óleo essencial avaliado é composto por substâncias que propiciam um bom efeito larvicida, revelando sua eficiência no combate e controle do Aedes aegypti.