Os microrganismos são uma promissora fonte de novas moléculas e uma boa alternativa na busca por antimicrobianos. Contudo, suas condições de cultivo podem influenciar tanto no seu desenvolvimento quanto na sua produção de biomoléculas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da fotoexposição na atividade antimicrobiana de oito basidiomicetos. Estes foram cultivados em meio ágar-malte, à temperatura ambiente, mantidos com ou sem fotoexposição por dez dias. Foram obtidos extratos com acetato de etila, que foram testados pelo método de difusão em ágar contra os patógenos Escherichia coli CBAM 001, Staphylococcus aureus CBAM 0324 e Candida albicans CFAM 1342. Foi realizada a identificação molecular dos basidiomicetos através de amplificação e sequenciamento do fragmento de rDNA. Os fungos Pleurotus sp. 474 e Gloeophyllum sp. 1153 inibiram o crescimento de E. coli CBAM 001, S. aureus CBAM 0324 e C. albicans CFAM 1342. Nenhum desses patógenos foi inibido pelo fungo Schizophyllum commune 1210. A fotoexposição foi essencial para o fungo Earliella scabrosa 1552 inibir o crescimento da C. albicans, enquanto a ausência de fotoexposição foi essencial para o fungo Pleurotus sp. 474 inibir o crescimento do S. aureus CBAM 0324 e, os fungos Gloeophyllum sp. 1153, Trametes sp. 1232 e Oudemansiella canarii 1528 inibirem a E. coli CBAM 001. Estes resultados mostraram a influência da fotoexposição na produção de antimicrobianos por basidiomicetos, reforçando a importância da escolha das condições de cultivo.