Introducción La leptospirosis es una zoonosis de distribución mundial causada por una bacteria del género Leptospira que afecta a animales salvajes y domésticos. Tras la confirmación de dos casos de leptospirosis en el establecimiento penitenciario La Picota de Bogotá, se generó una respuesta de investigación y control del brote en coordinación con la Secretaria de Salud de Bogotá (SDS), Subred Centro Oriente, Instituto Nacional Penitenciario y Carcelario (INPEC), e Instituto Nacional de Salud (INS). Los objetivos fueron confirmar el brote, identificar la etiología y caracterizar los casos para orientar acciones de control y prevención Metodología Se realizó un estudio de investigación de brote. Se definieron los patios dos y tres del establecimiento penitenciario como área de foco. La información se recolectó mediante búsqueda activa y pasiva institucional en un instrumento diseñado para registro individual de casos con datos básicos de identificación y del cuadro clínico. Se recolectaron muestras de suero de siete pacientes para microaglutinación (MAT). Los datos fueron registrados y procesados en el programa Microsoft Excel 2016®, presentando en tablas y gráficas de frecuencias las características clínicas de los casos. Resultados Se presentaron tres casos de leptospirosis confirmados por microaglutinación (MAT), distribuidos en el patio dos y tres del penal. La tasa de ataque para el patio dos fue de 0,2 % y para el patio tres de 0,1%. Durante las visitas se evidenciaron condiciones de hacinamiento, ventilación deficiente en la estructura del penal, almacenamiento de comida en las celdas, e incluso, se observó que se tratan a los roedores como mascotas. Según la definición de caso establecida para el brote, el 100 % de los casos presentaron fiebre e ictericia, y el 66.6 % síntomas urinarios y diarrea. Los resultados de laboratorio fueron positivos a leptospirosis por técnica MAT con circulación de siete serogrupos en los pacientes captados. Conclusiones Se logró la caracterización del brote de leptospirosis en el centro penitenciario La Picota. Teniendo en cuenta los factores de riesgo encontrados en el penal, se requiere el fortalecimiento de los procesos de capacitación y divulgación del Protocolo de vigilancia de leptospirosis en el personal de salud de la institución y de las acciones de comunicación del riesgo en la comunidad.