O sêmen de 11 touros búfalos, da raça Murrah, com idade variando de cinco a seis anos foi coletado por vagina artificial e submetidos às análises das características físicas e morfológicas. O experimento objetivou testar in vitro a eficácia de quatro diferentes extensores: Controle (TRIS com 10% LDL) e o mesmo extensor nas concentrações de 0,5; 1,0 e 2,0% de lecitina de soja sobre a longevidade espermática de búfalos no processo de refrigeração a 5 oC por 1, 24, 48, 72, 96 e 120 horas. Após a coleta cada ejaculado foi fracionado em 4 alíquotas, para a obtenção de 50x106 SPTZ/mL, envasado em palhetas de 0,5 mL, refrigerado durante 4 horas obtendo-se uma curva de resfriamento de 0,25 oC/minuto. As palhetas foram mantidas refrigeradas a 5 oC e sequencialmente avaliadas, reaquecendo-se o conteúdo a 37 oC/30 segundos antes da avaliação da motilidade espermática (total e progressiva) utilizando o sistema computadorizado (CASA). Foram retiradas amostras para avaliação pelo teste hiposmótico (HOST) nos tempos 1, 24, 48 e 72 horas. Para a análise estatística utilizou-se o pacote STATA 12.0, sendo os valores obtidos submetidos ao Teste de Friedman (P < 0,05). Os espermatozoides progressivos e a integridade da membrana plasmática foram superiores (P < 0,05) no extensor de TRIS com 10% LDL acrescido de 0,5% Lecitina de soja (67,2 e 67,9%) no processo de refrigeração por 48 horas. Em conclusão, avaliação comparativa dos parâmetros espermáticos obtidos revelou que o extensor TRIS com 10% LDL acrescido de 0,5% de lecitina de soja, pode ser efetivamente usado para a preservação do sêmen de búfalo refrigerado em IA e IATF por até 48 horas.