Cogumelos do gênero Pleurotus são cultivados para fins alimentícios, medicinais e por serem fontes de enzimas de interesse industrial. O presente estudo teve como objetivo avaliar o crescimento micelial e verificar a atividade de proteases de P. djamor. Este cogumelo foi cultivado em ágar batata dextrose (BDA) com extrato de levedura (YE) 0,5% (p/v). Para avaliar a velocidade do crescimento micelial radial (VCR) e densidade micelial, P. djamor foi cultivado em cinco meios com YE 0,5% (p/v): ágar batata dextrose (BDA+YE), ágar Sabouraud (SAB+YE), ágar extrato de malte (MEA+YE), ágar inhame-roxo (PYA+YE) e ágar cará-de-espinho (SYA+YE). A atividade proteolítica foi determinada pelo método de bloco de gelose. Na avaliação do crescimento micelial vertical (VCM) foram utilizados exocarpos de cupuaçu (CE) e abacaxi (PE), semente de açaí (AS) e serragem (SAW), suplementados com farelo de arroz (RB) ou farelo de trigo (WB). A VCR significativa foi observada em SYA+YE (11,26 mm/dia) e PYA+YE (10,97 mm/dia). Porém, SAB+YE favoreceu a densidade micelial, portanto foi o meio selecionado para obtenção de inóculo nos testes de avaliação do crescimento micelial de P. djamor em resíduos lignocelulósicos. Atividade proteolítica significativa foi determinada em BDA+YE (17,7 mm), MEA+YE (17,6 mm) e SAB+YE (17,0 mm). Forte densidade micelial e VCM significativa foi determinada em CE+WB (0,37 cm/dia) e CE+RB (0,30 cm/dia). Substratos de floresta tropical são eficientes para o cultivo micelial e produção de proteases por P. djamor.