O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito do período de cultivo na micropropagação de brotações de Luehea divaricata. Os tratamentos foram compostos pelos períodos de cultivo in vitro: 14; 21; 28; 40; 56; 70; 84; 102; 116; 130; 154, 186 ou 200 dias, sem realizar subcultivo ou transferência para outro meio nutritivo fresco. A sobrevivência e o estabelecimento ficaram em torno de 90% até 84 dias de cultivo. A partir deste período, a mortalidade foi mais acentuada. Para as variáveis número total de folhas e folhas com senescência, o período de cultivo de 56 dias foi o que mostrou uma proporção mais adequada, em que para cada nove folhas formadas apenas uma estava senescente. Em relação à formação de raízes primárias, médias superiores a 50% foram observadas após 70 dias de cultivo in vitro, chegando aos melhores resultados (60%) aos 200 dias. Para raízes secundárias, as maiores médias foram observadas após 102 dias (41,5%), alcançando 45,3% aos 200 dias. A micropropagação de Luehea divaricata é afetada significativamente pelo período de cultivo in vitro, que pode ser estendido até aproximadamente 60 dias. A partir desse período, são registradas altas mortalidades.