O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito anti-inflamatório do dimetilsulfóxido (DMSO) em cadelas diagnosticadas com neoplasia mamária e submetidas à mastectomia unilateral associada com a ovariohisterectomia pelo acesso abdominal lateral (flanco). Foram utilizadas 20 cadelas de raça e massa corpórea variadas, e diagnosticadas com neoplasia mamária pelo exame citopatológico. Todos os animais foram submetidos à mastectomia unilateral e o DMSO, na dose de 1 g/kg, foi administrado por via intravenosa, 15 minutos antes do término do procedimento cirúrgico (15PRE), 24 (24hPOS) e 48 horas após o procedimento cirúrgico (48hPOS). As variáveis avaliadas incluíram a frequência respiratória, frequência cardíaca, temperatura corpórea, eritrograma, leucograma, bioquímica sanguínea sérica, aspecto macroscópico da ferida cirúrgica e efeitos colaterais do DMSO. Os parâmetros clínicos não apresentaram diferenças significativas entre os momentos avaliados. Os valores da temperatura corporal apresentaram um aumento significativo entre 15PRE e 24hPOS, 15PRE e 48hPOS. Os valores dos eritrócitos, hemoglobina, plaquetas, proteína sérica total e alanina aminotransferase apresentaram variações significativas ao longo dos momentos avaliados, porém permaneceram no padrão fisiológico da espécie. De acordo com os resultados, concluiu-se que o DMSO possui uma ação anti-inflamatória em cadelas submetidas à mastectomia unilateral associada com a ovariohisterectomia pelo acesso abdominal lateral (flanco), e seguro quando administrado na dose de 1 g/kg por via intravenosa durante três dias.