Objetivo. Determinar la presencia de Rickettsia typhi en roedores sinantrópicos capturados en la comunidad rural de Bolmay, Yucatán, México, con antecedentes de tifo murino en sus habitantes. Materiales y métodos. Se examinaron 37 roedores: 30 Mus musculus, 6 Rattus rattus y 1 Heteromys gaumeri. Se obtuvo ADN total del bazo de los roedores. La identificación de R. typhi se realizó a través de la amplificación de un fragmento del gen htrA (proteína 17-kDa) por PCR punto final. Los productos positivos fueron purificados y enviados a secuenciación para su análisis de alineamiento con la herramienta BLAST. Resultados. La identificación de ADN rickettsial se logró en un 27% (10/37) de los roedores: siete M. musculus y 3 R. rattus. El análisis de alineamiento obtuvo porcentajes de identidades y coberturas del 97 - 99% para R. typhi, respectivamente. Conclusiones. El presente estudio sugiere la participación de los roedores sinantrópicos en el ciclo de transmisión del tifo murino en la región. Se describe la primera evidencia molecular de R. typhi en M. musculus de Yucatán, México.