O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de produção e a qualidade do biogás a partir da biodigestão anaeróbia de resíduos de frutas e hortaliças (RFH) como substrato e duas fontes distintas de inóculo como fonte de biomassa bacteriana. Os resíduos foram coletados em uma Central de Abastecimento e os inóculos incluíram lodo anaeróbio secundário coletado em uma estação de tratamento de esgoto sanitário (inóculo/ES) e lodo anaeróbio coletado em um biodigestor abastecido com dejetos suínos (inóculo/DS). A determinação do potencial de produção de biogás foi realizada seguindo as diretrizes propostas pela norma VDI 4630. O volume de biogás foi medido diariamente e a composição determinada semanalmente por cromatografia gasosa. Os RFH apresentaram pH ácido, ausência de alcalinidade, elevada umidade e elevada concentração de material orgânico volátil. Os inóculos apresentaram pH próximo à neutralidade, resultante de processos anaeróbios bem estabilizados e a principal diferença foi observada para os teores de alcalinidade. A produção acumulada de biogás dos RFH foi de 362 mLN g SV–1 utilizando o inóculo/ES e 348 mLN g SV–1 utilizando com inóculo/DS, indicando similaridade independentemente do tipo de inóculo. No entanto, observaram-se diferenças quanto à produção diária e à concentração de metano. A utilização do inóculo–ES possibilitou a rápida conversão da matéria orgânica em biogás, com aproximadamente 90% da produção total gerada nos primeiros quatro dias. Os testes com o inóculo/DS apresentaram 60% de metano (totalizando 210 mLN CH4 g SV–1) e os testes com inóculo/ES 51% de metano (totalizando 184 mLN CH4 g SV–1). Mesmo com maior capacidade de degradação durante o processo, o inóculo/DS permitiu uma produção acumulada de metano 14% superior quando comparada ao inóculo/ES.