RESUMO: A gravidez é um desafio para o sistema imunológico, porque tem de tolerar um feto geneticamente diferente e ao mesmo tempo proteger tanto a mãe como o feto contra ameaças biológicas. Isto requer uma regulação estreita dos vários tipos de células do sistema imunitário durante as diferentes fases da gravidez. Estudos recentes revelaram que determinadas subpopulações de células B e células T têm funções reguladoras e são essenciais para a manutenção da tolerância materno-fetal durante as fases iniciais da gravidez. No entanto, não está claro se as células do sistema imunológico materno, especialmente as recém descritas células reguladoras B (Breg) e T (Treg), também podem desempenhar um papel relevante no final da gravidez normal, no parto e no pós-parto. Com o objetivo de analisar o perfil imunológico desde o final da gravidez até ao pós-parto, foram efetuados três estudos observacionais que seguiram mulheres saudáveis, grávidas (n = 43) e não grávidas (como grupo controlo; n = 35), vigiadas na consulta externa do hospital CUF Descobertas. Em primeiro lugar, as contagens no sangue periférico das subpopulações de linfócitos B, considerando o perfil maturativo e incluindo as células Breg, foram analisadas em todas as mulheres grávidas durante o terceiro trimestre da gravidez, no dia do parto (imediatamente após o parto), e no pós-parto (pelo menos 6 semanas após o parto), e comparadas com as do grupo de mulheres não grávidas. Em segundo lugar, a evolução das subpopulações de células Treg foi avaliada no sangue periférico das mulheres grávidas nos mesmos pontos temporais do estudo anterior, e comparadas com as do grupo de controlo. Em terceiro lugar, o efeito do trabalho de parto sobre as subpopulações circulantes de células T, e sobre as subpopulações de células Treg e Breg, foi avaliado no dia do parto, comparando o subgrupo de mulheres grávidas que tiveram o parto por cesariana eletiva (sem trabalho de parto; n = 14), com as que tiveram um parto espontâneo vaginal (após o trabalho de parto; n = 18). A quantificação e a caracterização fenotípica de células B e células T foi efetuada por citometria de fluxo, de acordo com a expressão dos marcadores de superfície celular presentes nas suas diferentes subpopulações. Especificamente, as subpopulações de células B foram caracterizadas no sangue periférico pela expressão de CD19 (marcador de células B), e pela expressão de IgD e CD38 para identificar o perfil maturativo dos linfócitos B de acordo com o sistema de classificação Bm1-5: células B de transição, células B naïve, células B de memória não switched, células B de memória switched entretanto divididas em células pós centro germinativo e células de memória em repouso, e ainda plasmablastos. Os linfócitos Breg foram caracterizados através da expressão de CD24, CD27, CD38, e a produção de IL-10 foi avaliada após a estimulação com acetato de forbolmiristato (PMA), ionóforo de cálcio e lipopolissacárido (LPS) bacteriano. Relativamente às subpopulações de células T de sangue periférico, as células com expressão de CD3 (marcador de células T) que co-expressam CD4 (células T auxiliadoras) ou CD8 (células T citotóxicas) foram diferenciadas em naïve, memória central, memória efetoras, memória efetoras com diferenciação terminal utilizando os marcadores de superfície de células CD45RA e CD62L. A expressão de marcadores de ativação (HLA-DR e CD25) foi avaliada na população de linfócitos T totais e nas respetivas subpopulações de células T CD4 e CD8. Além disso, as células T natural killer (NKT)-like foram identificados pela co-expressão de CD3, CD16 e CD56. Finalmente, três estratégias analíticas foram utilizadas para caracterizar as células Treg (CD4DimCD25Hi, CD4+CD25HiCD127-/dim e CD4+CD25HiFoxp3+). Foi também efetuada a avaliação da expressão intracelular de Foxp3 na subpopulação de células Treg CD4DimCD25Hi. Os resultados mostraram que as contagens absolutas e percentuais dos linfócitos B foram significativamente mais baixas (p