A família Cichlidae é considerada um modelo para estudos de radiação adaptativa entre vertebrados. Contudo, dados citogenéticos com vistas ao entendimento da evolução cariotípica dessa família ainda são incipientes, sobretudo para espécies da região semi-árida do nordeste do Brasil. O presente estudo traz as primeiras informações cariotípicas das espécies neotropicais Crenicichla menezesi e Cichlasoma orientale, a partir de técnicas de coloração convencional, bandamento-C, impregnação argêntea e coloração com fluorocromos base-específicos. Ambas as espécies apresentam 2n=48 cromossomos, com distinções em relação ao cariótipo, onde C. menezesi exibe 4m+44st/a (NF=52) e C. orientale 6sm+10st+32a (N=54). Os sítios ribossomais são simples localizados nos braços curtos do primeiro par (m) em C. menezesi e no terceiro (sm) em C. orientale. Em ambas as espécies os blocos heterocromáticos concentraram-se as regiões centroméricas e pericentroméricas e de forma conspícua em colocalização com as RONs (CMA+/DAPI-). Entre os ciclídeos, o clado Neotropical revela um conservadorismo cromossômico numérico (2n=48), mas que contempla um variado dinamismo evolutivo quanto aos padrões estruturais do cariótipo. As duas espécies analisadas, Crenicichla menezesi e Cichlasoma orientale, típicas de regiões semi-áridas, reforçam esta condição.